Что представляет собой анализ ПЦР на туберкулез

ПЦР на туберкулез — сравнительно молодой, но результативный и комплексный метод обнаружения инфекции. Туберкулез — опасное инфекционное заболевание, которое характеризуется высоким уровнем смертности. Диагностированное на ранней стадии, оно успешно поддается лечению. Анализ ПЦР на туберкулез позволяет оперативно выявить заболевание и незамедлительно начать лечение. Это повышает шансы больного на полное выздоровление без возникновения осложнений.

Общее описание метода

Лаборант

ПЦР (полимеразная цепная реакция) как метод диагностики заболеваний — изобретение американского ученого К. Муллиса, получившего за него Нобелевскую премию в 1993 году. Сущность метода заключается в копировании ДНК микроорганизмов из исследуемого биоматериала в длинные цепочки для последующей идентификации.

Весь процесс диагностики этим методом проводится в три этапа:
  1. Забор биоматериала.
  2. Синтез молекул ДНК.
  3. Расшифровка результата.

Процесс амплификации требует строгого соблюдения необходимых параметров. Поэтому от лаборанта требуется максимум внимания и аккуратности.

Реакция запускается в амплификаторе — специальной камере, в которой под воздействием температур и различных ферментов происходит выявление патогенной ДНК и искусственное достраивание ее в длинные цепочки.

В амплификаторе происходят сложные химические реакции:
  • денатурация — разъединение цепи ДНК на две цепочки под воздействием высокой температуры (98 град. Цельсия), которое длится около двух минут;
  • отжиг — снижение температуры до 56 град. Цельсия для связи праймера с нитью ДНК;
  • элонгация — на этом этапе синтезируются необходимые молекулы ДНК.

Эти этапы циклично повторяются, и в итоге получаются цепочки ДНК молекул-возбудителей, если они присутствуют в исследуемом материале.

Пройдите бесплатный онлайн-тест на туберкулез

Этот тест позволит вам определить вероятность того, есть ли у вас туберкулез.

Сбор биоматериала

Анализ ПЦР является довольно сложной процедурой, в которой отклонение от нужных параметров может фатально повлиять на результат. Поэтому нужно со всей серьезностью отнестись к подготовке исследуемого биоматериала.

В качестве исследуемой среды выбирается любая биологическая жидкость:
  • Кровькровь;
  • моча;
  • мокрота;
  • смывная жидкость из бронхов;
  • соскоб с любого органа;
  • жидкость спинного мозга;
  • мазки из половых органов.

 Подготовка к сдаче анализа ПЦР на туберкулез зависит от выбранного биоматериала.

Если это кровь, то пациент должен придерживаться общих правил подготовки к сдаче анализа: не принимать пищу более 8 часов, не курить, не употреблять алкоголь, не принимать лекарственные препараты.

Если это мокрота, то собирать ее нужно в утренние часы после тщательного туалета полости рта. Вечером необходимо принять муколитический препарат для улучшения отхождения мокроты.

Моча собирается в стерильную емкость и также в утренние часы перед употреблением пищи и медикаментов. Сбору мочи должно предшествовать умывание.

Некоторые препараты (например, антибиотики, гепарин) оказывают негативное влияние на достоверность результата анализа. Поэтому за две недели до проведения исследования методом ПЦР следует исключить их применение.

Остальные виды биоматериала сдаются только в условиях стационара или поликлиники. Например, кровь для анализа после сбора в стерильный шприц должна находиться в специальных условиях, не позволяющих ей свернуться. А спинномозговую жидкость сможет собрать только квалифицированный специалист в больнице.

Интерпретация результата анализа

На основании результатов проведенного анализа врач дает заключение, которое может быть как простым, так и расширенным. Простой результат выдает один из двух параметров: наличие или отсутствие возбудителя. Расширенный метод, кроме положительного результата, определяет дополнительные параметры — очаг и степень распространения, — которые позволяют назначить более эффективное лечение.

ЛабоарторияПри исследовании методом ПЦР живые и мертвые микроорганизмы не различаются, и результат после лечения некоторое время будет положительным. Поэтому повторное исследование врач назначает примерно через месяц после окончания терапии.

Достоверную трактовку результата может дать только врач-фтизиатр.

Записи заключений выглядят следующим образом:
  • положительный результат — «Mycobacterium tuberculosis»;
  • отрицательный результат — «Mycobacterium tuberculosi не обнаружены» или «обнаружено недостаточное количество детектируемых частиц».

Также существует ложноположительный результат. В этом случае либо обнаруживаются нежизнеспособные возбудители, либо анализ проводился с нарушением технологии.

Преимущества и недостатки методики

На сегодняшний день ПЦР диагностика на туберкулез занимает первое место по использованию в сравнении с другими методами обнаружения этого заболевания. Опыт использования анализа ПЦР говорит как о преимуществах, так и о недостатках.

Учитывая все плюсы и минусы ПЦР диагностики, следует принять во внимание другие виды исследований. Также рекомендуется провести дополнительные тесты для получения полной и достоверной картины состояния организма.

К преимуществам метода относятся:
  1. Снимок грудиВысокая точность. Наличие даже небольшого количества микобактерий в биоматериале позволяет выявить заболевание.
  2. Оперативность. Время, которое тратится на исследование, включая сбор биологической жидкости, составляет не более 5 часов. Другие методы, например, посев культуры, заставляют ждать результат от 10 дней до месяца.
  3. Безопасность для пациента. Особенно актуально это для детей. Флюорографическое исследование опасно облучением, а для больных туберкулезом, снимки нужно делать периодически.
  4. При ПЦР диагностике можно исследовать любую биологическую среду, в том числе соскоб с любого органа, что позволяет выявить локальные очаги инфекции. При туберкулезе легких на анализ берется мокрота, при подозрении на туберкулезный менингит исследуют спинномозговую жидкость. Анализ крови и мочи менее достоверный в связи с тем, что в этих средах возбудители могут отсутствовать при местных формах туберкулеза.
  5. Кроме выявления наличия заболевания, диагностика информирует о чувствительности микобактерий к антибиотикам, что упрощает назначение лечения.
  6. Возможность диагностики заболевания на раннем этапе его развития, даже до появления первых симптомов.

К недостаткам ПЦР диагностики следует отнести высокую стоимость оборудования, невозможность оценить эффективность лечения сразу после его окончания и вероятность мутации возбудителей, которая может спровоцировать ложноположительный результат.

Показания для проведения диагностики

Диагностика туберкулеза методом ПЦР не имеет противопоказаний, но есть случаи, когда этот вид исследования остается единственно возможным.

И вот эти ситуации:
  1. БеременностьНеоднозначность симптоматики затрудняет постановку диагноза. Например, тяжелые поражения легких, сопровождающиеся сильным кашлем и присутствием крови в мокроте.
  2. Контакт с больным туберкулезом.
  3. Беременность.
  4. Экстренные случаи. Например, предстоящая операция.
  5. Сомнительная реакция на пробу Манту, а также аллергические реакции на компоненты туберкулина.
  6. Детский возраст.
  7. Невозможность диагностирования заболевания другими методами при наличии явных симптомов.
  8. ВИЧ-инфекция.

Для пациентов с иммунодефицитом метод ПЦР является ведущим. Другие методы для таких больных дают недостоверный результат либо неполную информацию о стадии заболевания.

Направление для проведения диагностики методом ПЦР могут выдать терапевт, пульмонолог, фтизиатр, педиатр (для детей). После проведения анализа, показавшего наличие инфекции, лечением занимается только врач-фтизиатр. Он дает заключение, ставит диагноз, назначает дополнительное обследование и наблюдает за состоянием пациента вплоть до выздоровления.

Альтернативные методы диагностики туберкулеза

Альтернативные методы диагностики туберкулеза не потеряли своей актуальности и после внедрения ПЦР. Они востребованы в случае отсутствия возможности проведения диагностики методом ПЦР, и, если результат анализа, выполненный этим методом, вызывает сомнения.

Существуют следующие способы обнаружения заболевания:
  1. Визуальный осмотр и опрос больного.
  2. Тест на туберкулез (проба Манту).
  3. Флюорография или рентген.
  4. Бактериологическое исследование биоматериала на флору.

Эти методы диагностики доступны каждому пациенту.

Заболеваемость туберкулезом ежегодно растет, еще быстрее растет смертность от этого недуга. Поэтому каждому необходимо помнить о профилактических мероприятиях, позволяющих как максимум не заразиться туберкулезом и как минимум выявить болезнь своевременно. Выбор метода диагностики при этом остается за пациентом.

Вышеуказанные методы не дают стопроцентно достоверного результата и имеют ряд недостатков:
  • Врачсимптомы, выявленные при осмотре и опросе пациента, дают лишь предположительные варианты состояния больного. Эти данные определяют ход дальнейшего обследования;
  • использование тестов на туберкулез имеет много противопоказаний и требует соблюдения конкретных правил. В числе противопоказаний стоит отметить аллергическую реакцию, покой от других прививок более тридцати дней, заболевания кожи. После введения туберкулина место укола нельзя трогать, мочить — эти условия трудно создать для детей;
  • флюорографическое исследование чревато облучением, что недопустимо для беременных, детей, людей с ослабленным иммунитетом или иммунодефицитом;
  • бактериологическое исследование проводится достаточно долго. Ожидание результата может затянуться на месяц.

Эти процедуры подходят скорее для подтверждения отсутствия инфекции в организме и имеют больше профилактическую направленность. Если же есть малейшее подозрение на заражение, то лучшим методом диагностики, несомненно, будет диагностика методом ПЦР.

Дети и туберкулез

Детей необходимо особенно беречь от заражения, потому что инфекция годами может не проявлять никаких признаков, но уже отрицательно сказывается на здоровье неокрепшего растущего организма малыша.

Позже происходит быстрая смена стадий заболевания:
  1. МантуЛатентная стадия, длящаяся до года. Делится на две фазы. Первая характеризуется отсутствием симптомов и отрицательной реакцией на пробу Манту. Вторая фаза дает положительный результат на пробу Манту.
  2. Туберкулезная интоксикация. Симптоматика более выражена на этой стадии заболевания. Появляются вялость, апатия, плохой аппетит, повышенная утомляемость, анемия, увеличение лимфоузлов, возможное увеличение печени и селезенки, незначительное и стабильное повышение температуры, снижение тонуса мышечной ткани. Длится этот период недолго.
  3. Первичная туберкулезная форма. Признаками этой стадии являются возникновение очага воспаления в месте локализации инфекции, лимфаденит, воспаление лимфоузлов в зоне распространения инфекции. У ребенка начинаются головные боли, прогрессирует кашель и одышка.
  4. Туберкулезный бронхоаденит. Стадия характеризуется кашлем со звучанием в два тона, болью в лопатках, шуме на выдохе. Эти симптомы возникают из-за воспаления лимфоузлов, находящихся в легких.

Эффективным методом профилактики детского туберкулеза является прививка БЦЖ. Первый раз ребенка прививают в роддоме. Вакцина содержит неактивные бактерии бычьего туберкулеза, и дает стойкий иммунитет почти на 7 лет. Также не стоит пренебрегать банальной гигиеной после нахождения ребенка в общественных местах.

К одному из способов обнаружения заболевания относят тест на туберкулез, или пробу Манту, который применяется у детей 1-15 лет ежегодно. При этом под кожу вводится некоторое количество разрушенных туберкулезных палочек. Если в организме ребенка присутствует инфекция, то место укола становится сильно воспаленным и напоминает бляшку.

Другим способом диагностики является ПЦР диагностика. При наличии противопоказаний к введению теста на туберкулез и при подозрении на заболевание этот анализ становится незаменимым видом исследования для ребенка.

Чаще всего у ребенка берут на анализ кровь в связи со сложностью забора другого материала. В исключительных случаях мероприятия по сбору необходимых биоматериалов все же организуются. Чувствительность анализа ниже, чем у взрослых: 25-83 % у детей против 90-100 % у взрослого.

При малейших подозрениях на туберкулез у ребенка необходимо как можно быстрее выяснить, инфицирован ли он. Самым безопасным и простым методом диагностики является анализ методом ПЦР. Своевременность принятых мер предотвратит осложнения, а может быть, спасет ребенку жизнь. 

К дополнительным мероприятиям по выявлению туберкулеза у детей относят взятие общего анализа крови. На начальной стадии этот анализ будет неинформативным. Но прогрессирующий со временем туберкулёз постепенно приводит к изменениям состояния крови: повышается количество эритроцитов, сегментоядерных нейтрофилов, базофилов; происходит уменьшение количества лимфоцитов (примерно на 20 %), повышается СОЭ, периодически изменяется количество эозинофилов то в большую, то в меньшую сторону. Опытный врач по этим параметрам может заподозрить у ребенка наличие инфекции и назначит дополнительное обследование. Поэтому нельзя пренебрегать проведением ежегодных медицинских осмотров у детей.

Несмотря на колоссальный прогресс в науке, современная медицина до сих пор не смогла побороть высокий уровень заболеваемости туберкулезом и смертности от него. Поэтому профилактические меры предупреждения туберкулеза и контроль случайного заражения должны стать привычными как для детей, так и для взрослых.

Тест: Насколько сильно вы подвержены туберкулезу?

Данный тест покажет вам, насколько сильно вы подвержены туберкулезу.

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Добавить комментарий

5 − 1 =

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: