Как проводится и что показывает T spot тест на туберкулез

T spot тест на туберкулез — инновационный иммуноферментный количественный тест для выявления туберкулеза. Несмотря на малую известность и распространенность, в отличие от классической Манту и ее новаторского варианта — диаскинтеста, входит в первую пятерку диагностических методик. Spot тест (интерфероновый тест) — английская альтернатива квантиферонового теста. Применяется в России с 2012 года. В мире применяется в среднем 12 лет. Статус препарата мирового стандарта играет свою роль. Этот термин всегда вызывает заочное доверие и уважение. И действительно, люди активно интересуются инновационной методикой.

О диагностике

Спот тест на туберкулез разрабатывался в стенах Оксфордского университета как альтернатива классическим тестам при невозможности проведения инъекционной пробы Манту и диаскинтеста. Впервые тест был введен в мировую эксплуатацию в 2004 году на саммите Большой восьмерки. После чего стал распространяться по всему миру: США и Канада (2005 год), Южная Корея (2006 год), Китай (2010 год), Япония и Россия (2012 год). С 2015 года на территории России методика официально включена в список рекомендуемых государственных процедур для выявления и лечения туберкулеза у детей.

Статус рекомендуемой процедуры не делает тестирование доступным в рамках обязательного страхования. То есть процедура относится к платной медицине.

Форма выпуска теста — герметичная коробка со всеми необходимыми для проведения диагностики стерильными и одноразовыми элементами. В упаковке находится планшет (12 на 8 ячеек), антигены, пробирки, клеящиеся ленты, реактив, инструкция, элементы для положительного контроля, субстрат. После трактовки результата все предметы подлежат утилизации.

1. Проводить строго по технике «in vitro», следовать инструкции.
2. Допускается только профессиональное использование препарата.
3. Срок хранения закрытого препарата — год, открытого — до двух месяцев.
4. Не использовать комплект с истекшим сроком годности. Открытый реагент может храниться не больше указанного срока при температуре от 2 до 8 градусов тепла.
5. Нельзя использовать элементы разных наборов, особенно смешивать химические элементы из разных партий.
6. Строго соблюдать санитарно-гигиенические нормы (заочно все образцы крови считаются инфицированными, а химические элементы — опасными). Не допускать загрязнения планшетов или клеточной среды.
7. Для исследования подходит кровь, собранная не более 8 часов назад.
8. Транспортировать кровь можно только в герметичных контейнерах при положительных температурах в 18-25 градусов. Не допускается охлаждение и заморозка образцов.
9. Отрицательный результат не исключает инфицирования.
10. Трактовать итог теста можно только в совокупности с общей клинической картиной и результатами других исследований.

Содержащиеся в тесте белковые клетки микобактерий отсутствуют в вакцине БЦЖ и нетуберкулезных штаммов из окружающей среды. Это делает тест высоко информативным.

Полное название диагностической методики — T.SPOT.TB (транскрипция — «тиспот»). Это не случайный набор букв, а аббревиатура на международном языке.

1. T символизирует название единиц крови, на которые происходит воздействие при тесте — Т-лимфоциты.
2. SPOT — пятно. Во время стимуляции лейкоцитов возникают пятна в месте зараженных клеток.
3. ТВ — международное название туберкулеза.

Тест разрешен к проведению среди всех социальных и возрастных групп, в том числе беременным и детям (включая новорожденных и грудных). Методика не только позволяет определить активные и латентные формы туберкулеза, но и способна их дифференцировать. Иммунодефицит и другие иммунные патологии не являются противопоказанием.

Главное достоинство теста, прельщающее большинство людей — проверка иммунитет проводится вне организма. Этой спецификой процедуры объясняется нейтрализация каких-либо последствий, противопоказаний и осложнений. Также пропадает вариант неверного результата диагностики из-за несоблюдения правил ухода за местом укола (при Манту и диаскинтесте) или влияния внешних факторов (солнце, одежда, вода).

Тест имеет свои преимущества и недостатки. К минусам относится низкая доступность (малая распространенность и высокая стоимость). Стоимость диагностики может достигать 6 000-7 000 рублей. Тест пока распространен только в больших городах типа Москвы, Питера, Нижнего Новгорода, Самары, Челябинска. Тест проводится в основном в крупных медицинских центрах или тубдиспансерах.

Получает распространение практика дистанционного тестирования в филиалах центров или в сотрудничающих клиниках. То есть сдать кровь можно в родном городе, а клиника, получившая материал, направит его для соответствующего исследования, например, в Москву. Стоимость такой услуги будет дороже, срок выполнения дольше, но качество то же (отличное). Будут соблюдены все нормы транспортировки и хранения биоматериала.

К другим недостаткам относится вероятность ложноотрицательных результатов, низкая эффективность при применении в очагах инфекции, невозможность применения для выявления активности болезни и ее динамики.

• высокопроцентная специфичность и чувствительность (в зависимости от региона колеблется от 87 до 97%);
• полное отсутствие противопоказаний;
• полное отсутствие риска осложнений;
• устойчивость к БЦЖ (не показывает ложноположительного результата);
• минимизация риска неправильной оценки (субъективный фактор сведен к нулю, то есть отсутствует вероятность неверного замера папулы или оценки покраснения вместо инфильтрата);
• позволяет отследить уровень иммунитета и отобрать группу для ревакцинации.

T-test назначается как альтернатива инъекционным методикам (предполагается, что он может заменять Манту и диаскинтест). Также эффективен в виде дополнительной диагностики для дифференциации диагноза, подтверждения или отрицания. Входит в группу тестов нового поколения. Анализ крови на туберкулез в корне отличается от привычных процедур. Первый относится к категории «инвитро» (в пробирке), вторые — к группе «инвиво» (в живой ткани).

Интерфероновый тест разрешен в тех случаях, когда запрещены инъекции: непереносимость активного вещества, аллергия и дерматит, эпилепсия, болезни (любой этимологии, в том числе инфекционные и простудные) и обострения хронических патологий. А также совместим с любыми прививками.

Прием каких-либо лекарственных средств на момент проведения теста тоже не является запретом. Допустимо сочетание с лучевой терапией, приемом антибиотиков, стероидов.

Тест подходит людям группы риска. В ее состав входят наркозависимые и тюремные заключенные, социальные работники, люди без определенного местожительства, путешественники или люди, вынужденные часто перемещаться из-за профессии, мигранты, диабетики, ВИЧ-инфицированные, медицинские работники, люди, зараженные внелегочным туберкулезом.

Тест позволяет эффективно обрабатывать клетки типа CD4 даже на поздних стадиях иммунных нарушений (именно эти клетки поражаются), что позволяет говорить о предпочтительности T-spot теста для диагностики ВИЧ-инфицированных.

Как и все туберкулезные диагностики, тест рекомендуется проводить раз в год. Людям группы риска — два раза в год.

T-spot — быстрый и точный тест, позволяющий выявить болезнь на ранней стадии. Что важно, так как упущение инфицирования чревато осложнениями и смертью для больного, эпидемиологической вспышкой для региона. Ложноположительный результат не менее опасен для организма, так как обычно предполагает дальнейшее профилактическое химиолечение, дополнительные диагностики. Что, в свою очередь, опасно переживаниями и стрессом.

Применение т спот теста как альтернативы Манту при диагностике на туберкулез актуально для родителей, разбирающих нюансы нового санитарного постановления. Согласно закону, родители вправе письменно отказаться от Манту, но тогда обязаны предоставить в образовательную или иную детскую организацию справку от фтизиатра о здоровье ребенка (то же касается поступления в школу или детский сад).

Такое заключение может быть предоставлено на основании результата другой диагностики. В этом случае на помощь и может прийти иммунный анализ крови. Метод хоть и дорогой, но безопасный и достоверный.

Технология теста и трактовка результатов

Для проведения теста берется венозная кровь. Количество зависит от возраста. У детей до двух лет берут 2 мл материала, от 2 до 9 — 4 мл, от 10 лет и старше — 8 мл.

Биоматериал сдается, как и все анализы крови, натощак (не менее 4 часов после еды). Перед тестом берется согласие самого тестируемого (с 18 лет) или его законных представителей.

При проведении теста специалист воздействует в рамках пробирки на Т-лимфоциты типа CD4 и CD8 (предварительно отделив их, промыв и очистив, сосчитав, антигенами туберкулеза (ESAT-6 и CFP-10), в результате вырабатываются субстанции. Их оставляют, в пробирку добавляют контраст. В результате его присоединения к подверженным туберкулезу клеткам образуется нерастворимый интерферон. Тест считает количество этих пятен. То есть выявляет антитела, вырабатываемые иммунитетом.

Для оценки результата лаборант производит манипуляции с пятнами из нулевой пробы и спотами из пробы с антигенами. Если в нулевом контроле содержится от одного до пяти пятен, то их вычитают из пробы с антигенами. Если от шести до десяти, то их умножают на два и полученное число вычитают из количества спотов в пробе с антигенами. Тестовое заключение будет готово за 20 минут-четыре дня (в среднем в течение суток).

1. Положительный (тестируемый инфицирован туберкулезом). Антитела найдены. Итоговое число спотов — от восьми до ста. Означает, что организм когда-либо контактировал с туберкулезной палочкой.
2. Отрицательный (не инфицирован). Антител не обнаружено. Итоговое число спотов — не более пяти. На основании этого итога и отсутствия внешних признаков инфицирования фтизиатр способен выдать справку о здоровье. Последнее (осмотр) нужен для опровержения вероятности пониженной реакции Т-лимфоцитов.
3. Сомнительный (неясный результат). Причина — более десяти спотов в пробирке при нулевом контроле, итоговое количество спотов равное пяти — семи или отказ человека от прохождения процедуры. Требует обязательной дополнительной или повторной диагностики.

На основании положительного результата нельзя диагностировать туберкулез, назначается дополнительное обследование (рентген, КТ, анализ мокроты, ПЦР). Положительный результат может ошибочно возникнуть на фоне недавно перенесенного заболевания или латентной формы туберкулеза.

К слову, в активную форму переходит всего 1% случаев от всех скрытых. Всего на планете 95% людей являются носителями микобактерий туберкулеза, то есть обладают той самой латентной формой. Данный факт позволяет усомниться в соразмерности и допустимости замены (в широком смысле этого слова) инъекционных проб на диагностику крови методом t-spot.

Иные диагностические методики

Туберкулез отличается высоким уровнем распространения и риском заражения. Вместе с этим не существует единой и оптимально эффективной лечебной терапии. Микобактерии туберкулеза отличаются высокой живучестью и способностью к генным модификациям, формированию устойчивости к лекарственным препаратам.

В рамках этих фактов диагностика и раннее выявление туберкулеза — важный элемент профилактики и лечения.

• инъекции Манту и диаскинтеста (стандартные зафиксированные на уровне законодательства тесты для детей и подростков);
• рентген и флюорография (назначается взрослому населению);
• химические анализы крови (ИФА, ПЦР, T-SPOT).

Каждый из способов диагностики способен дополнять другой. Окончательный диагноз всегда выносится только на основании комплекса качественных и количественных тестов.

В последнее время обострилась волна отказов родителей от проведения их детям инъекционных диагностик, что вызвало ответную реакцию в министерстве здравоохранения. По-своему правы обе стороны. Родители боятся осложнений, ложных результатов, опираются на реальные негативные истории из жизни, когда проведение туберкулиновой диагностики заканчивалось летальным исходом. Медики, в свою очередь, переживают за общее здоровье населения и хотят предотвратить эпидемиологические вспышки.

В отличие от инъекционных тестов, проводить T-test можно даже при выраженных симптомах туберкулеза. К ним относится устойчивая субфебрильная температура, ночная потливость, кашель более двух недель, слабость.